对亚硫酸氢盐转化的DNA进行全基因组扩增，用于PCR分析. REPLI-g Midi DNA Polymerase, EpiTect WBA Reaction Buffer, nuclease-free water for 25 whole bisulfitome amplification reactions.

Features

获得高产量的亚硫酸氢盐转化DNA，可用于多个PCR

专用于扩增亚硫酸氢盐转化后DNA

方便的一步建立反应体系

Product Details

EpiTect Whole Bisulfitome Kit包含DNA聚合酶、缓冲液和试剂，采用多重置换扩增（MDA）技术，用于经亚硫酸氢盐转化后DNA的全基因组扩增。EpiTect Whole Bisulfitome Kit使用经验证的REPLI-g技术，专为扩增经亚硫酸氢盐转化DNA研发（亚硫酸氢盐转化后其核苷酸组成已发生改变，且DNA片段更小），同时维持转化后序列。EpiTect Whole Bisulfitome Kit的常规DNA产量是每次反应1–3 μg，因此，单次亚硫酸氢盐反应获得的模板DNA可进行多达300次PCR分析。

Performance

EpiTect Whole Bisulfitome Kit是为所有甲基化分析提供足够DNA的理想工具，而不受亚硫酸氢盐转化后DNA量较少的限制。亚硫酸氢盐转化后的全基因组扩增（WBA）流程可获得高产的亚硫酸氢盐转化后DNA，同时配合含有独特DNA保护体系的EpiTect Bisulfite Kits维持转化后序列的表现。EpiTect Whole Bisulfitome Kit经检测优于其他供应商提供的扩增试剂盒。

Principle

基因组DNA序列的甲基化分析正面临着挑战，尤其在样本量较少的情况下。使用EpiTect Whole Bisulfitome Kit可高度一致的扩增亚硫酸氢盐转化后DNA的全基因组，无序列偏向性。该方法基于等温多重置换扩增（MDA）技术。复制过程中通过带有3'→5'外切酶校正活性的行进性DNA聚合酶确保其高保真扩增。

EpiTect Whole Bisulfitome Kit应用经验证的REPLI-g技术，专为扩增经亚硫酸氢盐转化后DNA研发（亚硫酸氢盐转化后其核苷酸组成已发生改变，且DNA片段更小），同时维持转化后序列的表现。配合含有独特DNA保护体系的EpiTect Bisulfite Kits，可获得最佳结果。这样可确保DNA有效变性，生成胞嘧啶完全转化所必需的单链DNA，同时避免由于高温、低pH值的亚硫酸氢盐处理引起的DNA过度断裂。通过预防DNA断裂可确保后续较长DNA片段的扩增。使用EpiTect Whole Bisulfitome Kit，通常每个反应获得的DNA的量为1–3 μg。

Procedure

方便的一步反应体系，即使用反应缓冲液和REPLI-g DNA聚合酶的混合液孵育亚硫酸氢盐转化后的模板DNA。加热失活聚合酶后，扩增的DNA可直接进行分析或贮存。

生物学和医药研究的很多领域中，尤其是肿瘤学、干细胞研究和发育生物学研究中，获得表观遗传学信息是首要任务。但是，由于缺乏提供可重复性数据的标准化方法，尤其是样本材料的限制，分析DNA的甲基化变化非常困难。QIAGEN最新推出的EpiTect方案，建立了从DNA样本收集、稳定和纯化到亚硫酸氢盐转化和real-time或终点式PCR甲基化分析或测序的标准化预分析和分析方案。

Applications

EpiTect Whole Bisulfitome Kit是为所有甲基化分析提供足够DNA的理想工具，而不受亚硫酸氢盐转化后DNA量较少的限制。每次使用10 ng DNA模板扩增获得的DNA，可进行100–300次real-time PCR分析（如使用EpiTect MethyLight PCR Kits）或终点法PCR（如使用EpiTect MSP Kits）。