高水平表达N端标记6xHis-tagged蛋白
Features
pQE-30载体在三个阅读框都有多克隆位点,用于快速克隆
pQE-40载体适用于低表达蛋白或短肽
pQE-40载体表达DHFR融合蛋白,提高稳定性和抗原性
Product Details
此系统提供5种质粒(pQE-9、pQE-30、pQE-31、pQE-32和pQE-40),用于表达N端带有His标签的蛋白。pQE-30、pQE-31和pQE-32在全部三个阅读框都有多克隆位点(MCS),而pQE-9含有另一种较短的多克隆位点。pQE-40用于表达DHFR融合蛋白,适用于表达低表达蛋白或易水解的短肽,DHFR可提高稳定性和抗原性。由于DHFR自身在小鼠和大鼠中几乎没有免疫原性,DHFR融合蛋白非常适合表位筛选。
Principle
QIAexpress pQE载体含有一个强大的噬菌体T5启动子(被E. coli RNA聚合酶识别),并含有两个lac操纵子遏制模块,用于在E. coli中严谨调控、高水平表达融合蛋白。在高水平lac遏制子存在的情况下,蛋白合成被有效断,细胞毒素载体的稳定性增强。pQE载体可在重组蛋白的N端或C端带上6xHis标签。
Procedure
编码目的蛋白的片段被克隆到合适的载体并转化至合适的E. coli表达菌株。加入IPTG诱导表达。Vector pQE-TriSystem载体可转化至E. coli,作为穿梭载体在昆虫细胞中表达重组蛋白,或转染至哺乳动物细胞。
Applications
QIAexpress Expression系统提供高水平蛋白表达,适用于多种应用,包括:
纯化功能、构象有活性的蛋白
变性条件纯化,用于抗体制备
结晶,用于确定三维结构
蛋白间和蛋白与DNA间相互作用分析