用于超快速和特异性PCR，适合各种PCR仪

Features

热启动PCR扩增，少于15分钟（35个循环）

适合各种PCR仪器

即用型预混液含有HotStarTaq Plus DNA Polymerase

可直接用于电泳上样的PCR缓冲液，操作简单快速

无需为快速PCR重新设计引物

Product Details

快速循环PCR预混液包含HotStarTaq Plus DNA Polymerase适合高特异性高灵敏度的PCR反应，以及独特的缓冲液体系用于极短时间的变性、退火和延伸步骤。专有的PCR缓冲体系明显缩短了聚合酶、引物和模板复合体形成所需的时间，因此将总的PCR循环时间从1.5小时左右缩短到20分钟。Optional CoraLoad Dye（同样包含在该试剂盒中）包括胶示踪染料，使分析更加简单。此外，该试剂盒还包含新型的辅助剂Q-Solution，有助于实现“困难”模板（比如，GC含量高的模板）的高效扩增。

Performance

QIAGEN Fast Cycling PCR Kit拥有高性能的HotStarTaq Plus DNA Polymerase以及在各种热循环仪上显著缩短的PCR循环时间。不同于其他常会致扩增失败的快速循环试剂，HotStarTaq Plus DNA Polymerase与QIAGEN Fast Cycling PCR Buffer结合使用，促进了特异性引物-模板退火并显著降低非特异性退火。可在每一个PCR循环中减少非特异性产物的扩增、以及引物二聚体的形成。使用创新的专有PCR缓冲液制定方案节约时间高达75%。PCR循环时间可以从超过1小时（35个循环）减少到少于20分钟。快速升温的PCR仪可以在30分钟内实现总PCR。可用Q-Solution，包含在该试剂盒中的新型辅助剂，优化PCR。

Principle

QIAGEN Fast Cycling PCR Kit以混合液规格提供，包含在每个循环仪上进行快速特异性扩增需要的所有组分。可有效扩增长达3.5 kb的基因组DNA和cDNA的PCR产物，包含复杂的模板。HotStarTaq Plus DNA Polymerase确保了高度特异性。使用新型的专利PCR缓冲液制定方案可显著节省时间高达75%，有效降低了形成聚合酶、引物和复杂模板。这能够让聚合酶在PCR退火阶段延伸引物，因此能有效缩短每个PCR循环中的退火过程。PCR循环时间可从超过1小时（35个循环）降低到少于20分钟。快速升降温的PCR仪可将整个PCR时间控制在30分钟内。

可靠的快速循环PCR所需组分

试剂盒组分                                                                       特征

                                                                                        高特异性产物（多达3.5 kb）

HotStarTaq Plus DNA Polymerase                                  高特异性 

                                                                                        室温设置

Fast Cycling PCR Buffer（包含Q-Bond Molecule）         高速 

                                                                                        需要最少的优化

CoralLoad Dye                                                                 可立即用凝胶加载PCR产物 

                                                                                        优化的可视移液器

Q-Solution                                                                       方便扩增的高GC模板

QIAGEN Fast Cycling PCR Master Mix                             方便快速的反应设置

高特异性和灵敏度

HotStarTaq Plus DNA Polymerase以混合液规格提供，确保了良好的热启动PCR性能。所提供的HotStarTaq Plus DNA Polymerase不具活性，在室温下没有聚合酶活性。因此可以防止较低温度时形成错配产物和引物二聚体，同时使常温下PCR体系的构建更加方便。 HotStarTaq Plus DNA Polymerase在95°C下，由短时的5分钟诱导激活，可以较易地纳入到各种现有的PCR仪程序中。

独特的快速循环PCR缓冲液

新型的Fast Cycling PCR Buffer优化了特异性PCR产物的扩增，并显著地减少了循环时间。基于原始的QIAGEN PCR Buffer，这种新的制备方案在每个PCR循环的短时退火步骤中，确保了特异性-非特异性引物结合的高比率。由于KCl和(NH4)2SO4独特的平衡结合，相对于传统的PCR缓冲液，该PCR缓冲液提供严格的引物退火条件，具有更广泛的退火温度和Mg2+浓度。使用这种缓冲体系可在宽泛的温度范围和Mg2+浓度下获得特异性扩增，因此可有效减少PCR的优化。

创新的快速循环缓冲液包含新型的Q-Bond Molecule。这种分子可以极大地提高DNA聚合酶和单链DNA的结合能力，因此有助于将退火时间减少到仅需5秒。独特的缓冲体系配方和经优化的DNA聚合酶浓度都极大地降低了变性和延伸时间。Fast Cycling PCR Buffer被开发，从而无需对每个引物-模板体系进行优化，节省了时间和经费。使用这种缓冲体系可在宽泛的温度范围和Mg2+浓度下获得特异性扩增，而省去了耗时的优化过程。

CoralLoad染料

QIAGEN Fast Cycling PCR Kit包含新型的CoralLoad Fast Cycling Dye。这种染料可以将PCR产物直接上样到琼脂糖凝胶中而无需加入凝胶上样缓冲液。CoralLoad Fast Cycling Dye包含2种染料：一种橙黄色染料和一种红色的染料，有助于估计DNA迁移距离并优化凝胶电泳时间。该染料提供了优化的移液器可视性并能直接方便地将PCR产物上样到凝胶上。

Q-Solution

QIAGEN Fast Cycling PCR Kit还包含一种新型的PCR辅助剂Q-Solution，可通过改变DNA的熔解过程，来辅助困难模板的扩增。这种独特的试剂可以改善由于大量的二级结构或高GC含量的模版所导致的不理想扩增。与常用的其他PCR辅助剂，如DMSO不同，Q-Solution只有一个工作浓度，并且保证无毒和高纯度。

Procedure

QIAGEN Fast Cycling PCR Kit为方便用户使用提供方便的混合液规格。HotStarTaq Plus DNA Polymerase在95°C下经5分钟诱导激活，此步骤可方便的纳入现有的热循环方案中。使用混合液的室温反应设置快速简易。将移液步骤最小化，减少了失误和污染的可能性，确保增加了通量和可重复性。该试剂盒包含用于快速简单PCR设置的精简优化实验方案。同样有该试剂盒提供的CoralLoad Dye增加了移液器的可视性，并确保可直接方便地将PCR产物上样到凝胶样上。

PCR循环时间可从超过1小时（35个循环）减少至少于20分钟。快速升温PCR仪可仅在30分钟内得到总PCR。The time savings afforded by the 由于QIAGEN Fast Cycling PCR Kit可节省时间，使其高度是用于通量增加的PCR反应，并且无需购买额外的昂贵实验设备。

节省大量时间

QIAGEN Fast Cycling PCR Kit通过使用现有的实验设备增加PCR通量。该试剂盒可用于各种PCR仪，包括无特异性缺失的快速升温PCR仪。此外，不同于其他PCR试剂，使用该试剂无需调整或改变引物或退火温度。每个试剂盒组分经精心设计以提供方便可靠的快速OCR。

不同片段长度的PCR循环时间

片段长度（bp）QIAGEN Fast Cycling操作流程（min）标准循环操作流程（min）节省时间（%）

200                                          15                                                     68                                78

500                                          20                                                     68                                71

1000                                        29                                                     85                                66

3000                                        63                                                     155                              59

Applications

QIAGEN Fast Cycling PCR Kit可用于各种PCR仪，能够增加PCR通量，并适用于高灵敏度和高特异性的PCR和常规PCR，以及以复杂基因组DNA和cDNA作为模板的PCR。该试剂盒高度适用于标准和快速PCR仪。

Supporting data and figures

Ready-to-load PCR reactions.

[A] CoralLoad PCR Buffer contains 2 gel-tracking dyes for improved pipetting visibility during PCR setup, enabling immediate gel loading of PCR products for [B] easy visualization of DNA migration.

Specifications

Features                              Specifications

Real-time or endpoint        Endpoint

Applications                        PCR, RT-PCR, Complex genomic templates, very low copy targets

Sample/target type            Genomic DNA and cDNA

With/without hotstart        With hotstart

Reaction type                     PCR amplification

Mastermix                          Yes

Single or multiplex            Single

Enzyme activity                  5' -> 3' exonuclease activity