从植物组织中制备基因组DNA较常采用的方法有氯化离心法、CTAB抽提法等。CTAB是一种阳离子去污剂，具有从低离子强度溶液中沉淀核酸与酸性多聚糖的特性。在高离子强度的溶液中，CTAB与蛋白质和多聚糖形成复合物，但不会沉淀核酸。再通过有机溶剂抽提，去除蛋白、多糖、酚类等杂质后，加入乙醇沉淀，即可使核酸分离出来。

储存温度：室温(15℃-25℃) 干燥保存

 产品组成：

2×CTAB 提取缓冲液成分：2%(w/v)CTAB，100mM Tris (pH 8.0)，20mM EDTA, 1.4 M NaCl,，还原剂(随用随加) 。

 实验操作步骤：

一 DNA提取：

1. 2×即用型CTAB提取液配制：按照终浓度0.2% （v/v）加入还原剂，如1 ml 2×CTAB提取缓冲液中加入2 μl还原剂。2×即用型CTAB提取液建议现用现配。

2. 材料研磨：取0.2-0.5克新鲜植物材料，于液氮中研磨成粉末。

3. 样品裂解：按照每100 mg研磨粉末使用0.5 ml提取缓冲液的比例将粉末转入1.5 ml离心管中，立即加入65℃预热的2×即用型CTAB提取缓冲液，65℃水浴30分钟，间歇混匀。

注：提取缓冲液使用量不要超过0.7 ml，否则后续纯化不能在一个离心管内完成；CTAB溶液在低于15℃时会形成沉淀析出，因此，在将其加入冰冷的植物材料之前必须预热，且离心时温度不要低于15℃。

4. 离心去杂质：14000 g 常温离心5分钟，转移上清至新的1.5 ml离心管中。

5. 去除RNA：上清中加入1/100上清体积的RNaseA溶液（10 mg/ml）（货号：RN001），如500 μl上清中加如5 μl RNaseA溶液，37℃处理20分钟。

6. 第一次抽提纯化：

6.1 步骤5溶液中加入等体积的DNA抽提溶液I（25:24:1）（货号：PC1015），轻缓颠倒离心管混匀8-10次，常温14000 g 离心10分钟，保留上清。

6.2. 重复抽提一次。

7. 第二次纯化：上清中加入等体积核酸抽提溶液（24:1）（货号：PC1017），颠倒离心管混匀8-10次，常温14000 g离心10分钟，保留上层水相。

8. 沉淀DNA：

8.1 将上层水相转入新的1.5 ml离心管中，加入0.6倍体积的冰冷异丙醇，轻柔混匀，-20℃静置30分钟；

8.2 14000 g4℃离心10分钟。

9. 漂洗DNA：

9.1 去上清液, 加入1ml 70%乙醇漂洗沉淀，4℃14000 g 3分钟，吸弃乙醇。

9.2 4℃ 14000 g 1分钟，用移液器吸尽残余乙醇，超净台吹干沉淀。

注：沉淀不能彻底干燥，否则不好溶解。

10. 贮存DNA：加入50-100 μl的超纯水或TE缓冲液（货号：TE1050）溶解DNA，-20℃保存备用。

二 RNA提取：

注：以下程序请注意所有试剂都要保证RNase-free。

1. 2×即用型CTAB提取液（RNase-free）（货号：RTG2405F）配制（现用现配）：2×CTAB提取缓冲液中按照1/1000体积加入DEPC，如100 ml中加入100 μl DEPC，混匀后过夜处理，高温高压，即为2×即用型CTAB提取缓冲液（RNase-free）。按照终浓度1 % （v/v）加入还原剂，如1 ml 2×CTAB提取缓冲液（RNase-free）中加入10 μl还原剂。2×即用型CTAB提取液建议现用现配。

2. 材料研磨：取0.2-0.5克新鲜植物材料，于液氮中研磨成粉末。

3. 样品裂解：按照每100 mg研磨粉末使用0.5 ml提取缓冲液的比例将粉末转入1.5 ml离心管中，立即加入65℃预热的2×即用型CTAB提取缓冲液，65℃水浴30分钟，间歇混匀。

注：提取缓冲液使用量不要超过0.7 ml，否则后续纯化不能在一个离心管内完成；CTAB溶液在低于15℃时会形成沉淀析出，因此，在将其加入冰冷的植物材料之前必须预热，且离心时温度不要低于15℃。

4. 离心去杂质：14000 g 常温离心5分钟，转移上清至新的1.5 ml离心管中。

5. 第一次纯化：上清中加入等体积的RNA抽提溶液I（25:24:1）（货号：PC1018），轻缓颠倒离心管混匀8-10次，常温14000 g 离心10分钟。

6. 第二次纯化：将上清液转入另一1.5 ml离心管中，加入等体积核酸抽提溶液（24:1）（货号：PC1017），颠倒离心管混匀8-10次，常温14000 g离心10分钟。

7. 沉淀RNA：将上层水相转入新的1.5 ml离心管中，加入1/2体积7.5 M LiCl（RNase-free）（货号：LC1030），轻柔混匀，-20℃ 静置30分钟；14000 g4℃离心10分钟。

9. 漂洗RNA：

9.1 去上清液, 沉淀中加入1ml 70%乙醇（RNase-free），吹打漂洗沉淀，14000 g4℃3分钟，吸弃乙醇。

9.2 14000 g4℃1分钟，用移液器吸尽残余乙醇，超净台吹干沉淀。

注：RNA沉淀不能过分干燥，否则不好溶解。

10. 贮存RNA：加入50-100 μl的RNase-free水（货号：RF001）溶解RNA，-80℃保存备用。

注意事项：

1、本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗，食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。

2、 为了您的安全和健康，请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。