统一服务热线:400-888-0207 在线咨询 | 微信联系
首页 > 产品 > 产品类型 > 试剂 > 生化试剂
Percoll 细胞分离液
货号:H0028 | 规格:100ml | 价格:¥0.00 | 品牌:BMASSAY
BMASSAY® 提供Percoll 细胞分离液。BMASSAY®提供众多高纯度的生化试剂,包括抗生素、氨基酸、维生素、酶和辅酶、蛋白质、缓冲液、染色剂、层析介质、动植物激素、糖 碳水化合物、酸和盐、碱基 核酸及其衍生物等。
Percoll不连续密度梯度沉淀法分离纯化淋巴细胞和淋巴母细胞

Percoll是一种包有乙烯吡咯烷酮的硅胶颗粒。渗透压很低(<20mosm/kg H2O), 粘度也很小,可形成高达1.3g/ml密度,采用预先形成的密度梯度时可在低离心力(200~1000g)于数分至数十分钟内达到满意的细胞分离结果。由于Percoll扩散常数低,所形成的梯度十分稳定。此外,Percoll不穿透生物膜,对细胞无毒害,因此广泛用于分离细胞、亚细胞成分、细菌及病毒,还可将受损细胞及其碎片与完好的活细胞分离。

操作方法及注意事项
1.不同浓度(密度)Percoll溶液的制备: 先用9份Percoll与1份8.5% NaCl或1.5MPBS混合达到生理性渗透压,然后用生理溶液(0.85% NaCl或0.15M PBS)稀释到所需浓度。
Percoll浓度(%) 70 60 50 40 30 20
比重g/ml 1.090 1.077 1.067 1.056 1.043 1.031

2.不连续密度梯度Percoll层的制备: 先将试管壁用牛血清湿润,除去多余血清,这种预处理可使逐层叠加的Percoll液平稳沿管壁流下,使形成满意的界面。在制备过程中一般用长针头注射器从高密度向低密度逐层放置,有时相邻两层Percoll比重相差不大时,可将Percoll液放入注射器中,小针头斜面紧贴管壁,任其自然慢慢流下。
3.装样:样品体积和细胞浓度根据不同细胞而异,一般加样体积不宜过大,细胞浓度也不可过高,否则会影响细胞的分离和回收。
4.离心:一般采用离心力为400g,时间20~25min。由于多层Percoll之间密度差别不大,因此离心机加速、降速时要慢,要平稳。
5.取样:当所要分离的细胞绝大部分在两层的界面时,可逐层去除Percoll液后收集界面部位的细胞;有时大部分细胞位于Percoll层中,则需要逐层收集。收获含有Percoll液的细胞经2次洗涤后可供培养或检测用。
相关产品
相关资料