超快速纯化至多750 µg转染级纯质粒或柯斯质粒DNA
Features
•少于60分钟制备时间
•无需离心即可澄清裂解液并进行异丙醇沉淀
•在沉淀过程中不会损失DNA
•可纯化至多750 µg高拷贝质粒DNA
•使用LyseBlue,获得最佳的裂解效果和最大的DNA产量
Product Details
HiSpeed Plasmid Kits使用阴离子交换技术,超快速、大规模纯化得到质粒DNA,无需离心。得到的DNA相当于两次CsCl梯度离心处理得到的纯度,适合转染级纯度的应用。
Performance
HiSpeed Plasmid Kits提供QIAfilter Cartridges、HiSpeed Tips和QIAprecipitator模块,用于快速、大规模的制备质粒,无需真空底座。针筒规格的QIAfilter和
QIAprecipitator模块取代了传统阴离子交换过程中的离心操作,质粒纯化更加方便、快捷。可从150–250 ml或50 µl – 150 ml的培养体积中纯化多至750 µg(Maxi)、
或200 µg(Midi)的高拷贝质粒DNA(培养体积取决于质粒拷贝数、插入片段大小、宿主菌和培养基)。HiSpeed Tip支持高流速,确保更快地完成DNA结合、洗涤和洗脱。
此外,HiSpeed tips中新型的阴离子交换树脂广泛用于核酸的纯化。其独特的分离特性使得到的DNA的纯度相当于两次氯化铯梯度离心处理得到的纯度。
Principle
QIAfilter Cartridges(参见"QIAfilter Cartridge")是一种特制的过滤器,专用于取代细菌细胞碱裂解之后的离心步骤。QIAfilter Cartridges可去除SDS沉淀,
只需很短的离心时间即可澄清细菌裂解液。预装的HiSpeed tips依靠重力流运行,确保不会流干,减少了质粒制备的手工操作时间。
独特的QIAprecipitator模块(参见"QIAprecipitator module")取代了异丙醇沉淀后传统的离心法纯化DNA。异丙醇混合液流过QIAprecipitator的时候DNA会结合上去,
然后用TE缓冲液或水将DNA从QIAprecipitator洗脱下来。这一独特的模块降低了离心后转移上清液过程丢失DNA的风险。
Procedure
经中和的细菌裂解液放入QIAfilter Cartridge中,几秒内过滤澄清。滤出液放至HiSpeed tip进行质粒DNA 纯化(参见"QIAGEN Plasmid Kit procedures")。
洗脱所得DNA与异丙醇混合并用注射器装入QIAprecipitator中。经浓缩和脱盐后,直接从QIAprecipitator上用TE缓冲液或水洗脱DNA。
Applications
HiSpeed Plasmid Kits纯化得到超纯转染级纯DNA,适合于多种应用,包括:克隆、测序、转染和质粒介导的基因沉默等。