用于从凝胶和溶液中纯化 DNA 片段（40 bp 至 50 kb）

Features

高效提取 40 bp 至 50 kb 的 DNA

从 TAE 或 TBE 琼脂糖凝胶和聚丙烯酰胺凝胶中提取凝胶

无碘化钠干扰后续反应

不剪切大 DNA 片段

Product Details

QIAEX II 系统提供了一种二氧化硅颗粒悬浮液，在离液盐存在的情况下，DNA 片段与该悬浮液结合。将 QIAEX II Suspension 添加到溶液或溶解的琼脂糖凝胶切片中并结合 DNA。通过短暂的离心收集颗粒，洗涤并在 Tris 缓冲液或水中洗脱 40 bp 至 50 kb 的 DNA。

Performance

使用 QIAEX II 系统，可有效回收 10 ng 至 10 µg DNA。使用 30 µl QIAEX II 悬浮液可以轻松地将凝胶片段批量纯化的通用程序放大至 15 µg 的结合容量。

QIAEX II 系统提供用于纯化 60–95% DNA 片段 (40 bp – 50 kb) 的硅胶颗粒。10 µl QIAEX II 悬浮液最多可结合 5 µg DNA，随后在 20 µl 中洗脱。

Recovery according to size

DNA大小                         回收率，百分比*

44 bp                                    75

75 bp                                    75

500 bp                                  95

7.5 KB                                   85

23.5 KB                                 75

48.5 KB                                 60

* 从 2 µg 上样到 1% TAE 琼脂糖凝胶上。

Principle

使用 QIAEX II 系统纯化 DNA 片段是基于在离液盐存在下琼脂糖溶解和核酸选择性吸附到 QIAEX II 硅胶颗粒上。QIAEX II 从盐、琼脂糖、聚丙烯酰胺、染料、蛋白质和核苷酸中分离 DNA，无需苯酚提取或乙醇沉淀。QIAEX II 对 TAE 或 TBE 缓冲液中的任何类型的琼脂糖都有效。

QIAEX II 颗粒为凝胶提取提供浆液，确保高效回收而无需剪切，即使对于大 DNA 片段也是如此。优化的缓冲液可以在没有碘化钠的情况下进行 DNA 回收，碘化钠很难从 DNA 样品中去除，并可能影响后续反应。

QIAEX II 系统使用的溶解和结合缓冲液含有独特的 pH 指示剂。简单的颜色变化表明结合混合物的 pH 值是否最适合将 DNA 有效吸附到 QIAEX II 硅胶颗粒上。有色染料还可以轻松观察结合混合物中任何未溶解的琼脂糖，确保完全溶解以获得最大产量。

溶解和结合缓冲液中的 pH 指示染料可以轻松直观地确定 DNA 吸附的最佳 pH（pH ≤7.5）。如果琼脂糖凝胶电泳缓冲液经常使用或制备不正确，可能会出现不正确的结合混合物 pH 值。在这种情况下，可以通过添加 10 µl 3 M 醋酸钠 (pH 5.0) 轻松调节 pH 值。

Procedure

将 QIAEX II 硅胶颗粒添加到溶解的凝胶切片中，并通过简短的离心步骤收集颗粒。洗涤后，纯 DNA 片段在 20 µl Tris 缓冲液或水中洗脱。

QIAEX II 系统提供 QIAEX II 悬浮液以及结合和洗涤缓冲液，以及一本综合手册。提供了从琼脂糖凝胶、溶液和聚丙烯酰胺凝胶中纯化 DNA 的方案。

Applications

使用 QIAEX II 系统纯化的 DNA 可直接用于大多数应用，包括：

限制性消化

标签

结扎

聚合酶链反应

特征                                                                规格

结合能力                                                      5微克/10微升

洗脱体积                                                      20微升

格式                                                             管子

片段大小                                                      40 bp – 50 kb

加工                                                             手动的

回收：寡核苷酸 dsDNA                                回收：dsDNA 片段

去除 <10mers 17–40mers 染料终止蛋白      去除 <40mers

样品类型：应用                                             DNA：PCR反应

技术                                                              二氧化硅技术

Supporting data and figures

持续恢复。

显示了使用 QIAEX II Gel Extraction Kit 从 1% 琼脂糖凝胶中回收不同数量的 2.9 kb DNA 片段。