Taq DNA Polymerase是从克隆有Thermu aquaticus DNA Polymerase基因的大肠杆菌经诱导表达后分离纯化的,其分子量为94 KD。具有5’-3’DNA聚合酶活性和5’-3’外切核酸酶活性,无3’-5’外切酶活性。在PCR反应中,Real Taq DNA Polymerase延伸速度为1-2 kb/分钟,产物3’端带A,可直接用TA载体克隆。该酶无外源核酸酶和细菌基因组DNA污染,稳定性好,特异性强,一般用于小于6kb的对保真度要求不高的DNA片段的PCR扩增、DNA标记、引物延伸、序列测定、平末端加A等。
● 活性定义
1单位(U) Taq DNA Polymerase活力定义为在74℃、30分钟内,以活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物,将10 nmol脱氧核苷酸掺入到酸不溶物质所需的酶量。
● 酶贮存缓冲液
20 mM Tris-HCl (pH 8.0);0.1 mMEDTA;1 mMDTT;100 mMKCl ; Stabilizers; 50% glycerol
● 10×Taq Buffer
200 mM Tris-HCl (pH 8.4);200 mMKCl;15 mMMgCl2; 其它成分。
● 反应举例:
注意:以下举例为常规PCR反应系统,仅供参考。实际反应条件因模板、引物等的结构不同而各异,需根据模板、目的片段的大小、碱基序列和引物长短等具体情况,设定最佳反应条件。
以人基因组DNA为模板,扩增1 kb的片段
1.反应体系的建立:50 ml反应体系如下(可根据比例放大或缩小反应体系):
2. PCR反应循环的设置:
3. 结果检测:反应结束后取5 ml反应产物,琼脂糖凝胶电泳检测。
● 浓 度: 5 U/ml
● 储存条件:
-20℃
●注意:
1. 本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗,食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。
2. 为了您的安全和健康,请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。