灵敏、可靠的检测病毒RNA/DNA和细菌DNA,含有内参
Features
同时检测目标病原体和内参
5x预混液具有更高的灵敏度,且起始样本量更大
正确解读阴性信号,检测灵敏度更高
清晰检测微弱的阳性信号
快速的通用型实验方案适用于标准和快速PCR仪
Product Details
QuantiFast Pathogen +IC Kits使用序列特异性探针,可灵敏、快速的对病原体核酸进行real-time PCR或一步法RT-PCR检测。该试剂盒含有检测4个用户定义的病原体核酸(如:病毒、细菌、真菌等)所需的试剂和内参,可对阴性结果进行正确解读,提高了检测灵敏度。该试剂盒有两种规格。QuantiFast Pathogen RT-PCR +IC Kit含有RNA内参模板和内参引物/探针对,用于检测病毒RNA。QuantiFast Pathogen PCR +IC Kit含有DNA内参模板和内参引物/探针对,用于检测病毒、细菌或真菌DNA。这两种试剂盒均提供分装在两个管中的不同浓度的ROX染料,因此适用于多种real-time PCR仪。为便于使用,预混液可存放在2–8°C。
Performance
QuantiFast Pathogen +IC Kits可通过多重扩增,同时检测病毒RNA或DNA、以及自带的内参。实验方案专为快速PCR设计,适用于多数PCR仪,具有极高的可靠性。使用QuantiFast Pathogen +IC Kits同时扩增目标病原体和内参,提高了检测的可靠性,能够确保正确解读阴性结果。
该试剂盒提供QuantiTect Nucleic Acid Dilution Buffer,可在稀释和反应体系构建时稳定RNA和DNA标准品,避免核酸损失。能够可靠的稀释标准品,进而用于核酸的定量检测,检测范围广,覆盖从低至高的CT值。该缓冲液能够确保标准品长期保存不降解。
Principle
为避免假阴性结果,所有QuantiFast Pathogen +IC Kit都含有必须的试剂,可real-time检测病原体和内参。在同一反应中扩增内参和靶基因,提高了定量检测的可靠性,减少了手动操作可能产生的错误。
QuantiFast Pathogen +IC Kits可通过多重PCR灵敏、快速的进行real-time检测,或通过一步法RT-PCR检测病原体。优化的预混液可确保PCR产物在多重扩增反应中以相同的效率和灵敏度扩增。特别研制的快速PCR缓冲液含有新型的添加剂Q-Bond,能够大幅度缩短变性、退火和延伸的时间。浓度平衡的K+和NH4+离子、以及独特的Factor MP能够促进引物和探针与核酸模板特异性结合,确保PCR效率高。此外,配方独特的Sensiscript Reverse Transcriptase能确保病毒RNA的高度灵敏的逆转录,HotStarTaq Plus DNA Polymerase则提供严格的热启动,防止非特异性产物的形成。
Procedure
QuantiFast Pathogen +IC Kits通过简单的流程,即可检测病原体和内参。试剂盒含有即用型预混液,可real-time检测病毒RNA(一步法RT-PCR)或病毒、细菌和真菌DNA(PCR)。无需优化反应条件。只需将预混液与检测试剂(引物与探针)、Internal Control Assay和Internal Control DNA或RNA 混合。也可在样本纯化步骤中加入内参,然后加入不含RNase的纯水至反应混合液。将样本DNA或RNA加入后即可开始反应,适用于各种PCR仪。试剂盒使用手册含有优化的实验方案,适用于TaqMan探针和多种PCR仪。使用手册中还推荐了可用的染料。
所有QuantiFast Pathogen +IC Kit都含有Internal Control Assay和Internal Control DNA或RNA,可直接加入反应混合液,用作扩增对照。此外,也可在纯化过程中加入内参,作为纯化和扩增的对照。如需在纯化过程中加入内参,可另外订购高浓度的Internal Control DNA或RNA (High conc.) 。
Applications
QuantiFast Pathogen +IC Kits利用序列特异性探针进行灵敏的real-time PCR或一步法RT-PCR,检测病原体DNA和/或RNA,以及内参。该试剂盒适用于多种real-time PCR仪,包括QIAGEN、Applied Biosystems、Bio-Rad、Roche和Agilent的仪器。