快速制备用于定量RT-PCR的cDNA,无需RNA纯化
Features
由细胞制备cDNA只需四个步骤,45分钟内即可完成
高灵敏度检测低丰度转录产物
易于同时处理多个样本
整合的gDNA去除步骤确保只检测RNA
无需设计RNA特异性引物或探针
Product Details
FastLane Cell cDNA Kit提供由培养细胞直接制备cDNA的方法,操作快速简单,无需纯化RNA。试剂盒提供洗涤和裂解缓冲液,以获得含有RNA的裂解液,同时应用gDNA Wipeput Buffer可去除基因组DNA污染,同时提供用于快速、高效合成cDNA的所有反应组分。该试剂盒适用于需要快速、高通量进行基因表达分析的实验。
Performance
FastLane Cell cDNA Kit制备的cDNA可以使两步法定量PCR得到高灵敏度、高重现性的检测结果。高品质的cDNA同样可用于对大于105个细胞到单个细胞进行检测。
Principle
FastLane Cell cDNA Kit使用FastLane技术可在45分钟内直接由培养细胞制备得到cDNA。为确保real-time RT-PCR只检测到RNA,可使用创新的gDNA Wipeout Buffer去除基因组DNA。无需设计RNA特异性引物或探针,节约时间和精力。
FastLane Cell cDNA Kit配合优化的QuantiTect、QuantiFast或Rotor-Gene Kits进行real-time RT-PCR,可在数小时内轻松处理并分析细胞样本。由此可对实验的若干转录产物进行快速检测,例如验证siRNA介导的基因沉默效果。
FastLane Cell cDNA Kit是FastLane Kits的一部分,可加快并实现无缝的基因表达分析流程。
Procedure
FastLane Cell cDNA Kit直接由培养细胞制备cDNA,只需4个步骤即可在45分钟内获得cDNA:细胞洗涤、细胞裂解并稳定RNA、基因组DNA去除和合成cDNA。制备的cDNA可直接用于两步法real-time RT-PCR。
该试剂盒提供足量用于24孔细胞培养板或48孔细胞培养板制备cDNA的试剂,如果应用96孔细胞培养板,需要额外购买QuantiTect Reverse Transcription Kit(50)。
FastLane Cell cDNA Kit制备的cDNA,可使用下列QuantiTect Kits中的一种通过两步法real-time RT-PCR进行分析:
SYBR® Green检测:QuantiTect SYBR® Green PCR Kit
探针:QuantiTect Probe PCR Kit
多重探针检测:QuantiTect Multiplex PCR Kits
FastLane Cell cDNA Kit配合QuantiFast Kit使用可进行快速的两步法real-time RT-PCR:
SYBR® Green检测:QuantiFast SYBR® Green PCR Kit
探针检测:QuantiFast Probe PCR Kits
多重探针检测:QuantiFast Multiplex PCR Kits
使用Rotor-Gene Q实时荧光定量PCR分析仪对FastLane Cell cDNA Kit制备的cDNA进行分析时,应用如下Rotor-Gene Kits可进行超快速的两步法real-time RT-PCR:
SYBR® Green检测:Rotor-Gene SYBR® Green PCR Kit
探针检测:Rotor-Gene Probe PCR Kit
多重探针检测:Rotor-Gene Multiplex PCR Kits
QuantiTect及QuantiFast Kits与多种real-time热循环仪兼容,包括Applied Biosystems提供的仪器。
Applications
FastLane Cell cDNA Kit适用于需要对在各转录本水平进行快速检测的实验,包括:
验证siRNA介导的基因沉默效果
评估药物效果
基因调控检测