在终点法PCR中,用于RNA模板量为50 ng到2 μg的逆转录反应
Features
高亲和力酶获得高产量cDNA
灵敏的检测低至10拷贝的模板
无需额外的RNase H消化
快速简单的操作流程,无需繁琐的移液步骤
Product Details
Omniscript Reverse Transcription (RT) Kit专为单次逆转录反应中使用50 ng至2 μg RNA模板而设计。与RNA的高亲和力使得Omniscript Reverse Transcriptase比其它逆转录酶表现更出色,即使是低拷贝模板,在RT-PCR中也能实现更高的灵敏度。Omniscript RT Kit包括Omniscript Reverse Transcriptase、dNTPs和优化的反应缓冲液。只需加入引物,即可简单快速合成cDNA。
Performance
高亲和力Omniscript Reverse Transcriptase (RT)在RT-PCR中具有高特异性和高灵敏度,即使是低拷贝转录,无需调整温度或反应条件即可通读复杂的RNA二级结构。
GC含量高的RNA区域可能导致逆转录反应停止、从RNA模板脱离或跳过RNA环外区域。经证明,这些难扩增模板对QIAGEN逆转录酶没有影响。无需优化,Omniscript RT Kit就可使逆转录反应顺利进行。
Principle
Omniscript Reverse Transcriptase (RT)与RNA的高亲和力确保多种模板逆转录反应的高效性和灵敏性,获得高产量cDNA。提供即用型dNTPs,经优化的反应缓冲液和与RNA高亲和力的Omniscript RT,可通读GC含量高或复杂二级结构的模板。请注意,不提供引物混合物。
Omniscript RT专为逆转录反应设计,单次反应使用50 ng到2 µg的RNA模板。另可作为病毒RNA的酶选择,因为在多数病毒RNA制备中存在载体RNA。在对比实验中,Omniscript RT的表现在一系列不同RNA起始量中都优于其它逆转录酶。
QIAGEN提供严格的质量控制,确保Omniscript Kits批与批之间的高重复性。所有Omniscript RT Kits都包括经优化的Buffer RT、dNTPs和纯水,保证不含RNase、每批Omniscript RT都进行全面得RT-PCR重复性测试。
Procedure
使用经优化的Omniscript Reverse Transcriptase反应缓冲液,无需繁琐的移液和预培养步骤,无需另外使用RNase H消化步骤。
Applications
Omniscript Reverse Transcriptase适合以下应用:
合成cDNA ,用于终点式PCR
合成双链cDNA,用于克隆
RACE(cDNA终点的快速扩增)
线性RNA扩增
指数型RNA扩增
SAGE(基因表达序列分析)
微阵列标记
引物延伸转录起始位点分析
Supporting data and figures
Full-length RT-PCR products — A.
RT-PCR was carried out with total RNA from maize leaves using the indicated RT reaction temperatures. A 1.2 kb fragment of the GC-rich maize gl2 transcript was amplified. RT was carried out using the standard Omniscript RT protocol at the standard (37°C) and higher reaction temperatures as indicated.
Specifications
Features Specifications
Applications RT-PCR, qRT-PCR, primer-extension, RACE analysis
Real-time or endpoint Endpoint
Mastermix No
Enzyme activity Reverse transcription
Single or multiplex Single
With/without hotstart Without hotstart
Reaction type Reverse transcription
Sample/target type RNA template