高水平表达C端标记6xHis-tagged蛋白
Features
表达C端带有6xHis标签的蛋白，确保纯化得到全长蛋白
pQE-16载体表达低表达蛋白，如DHFR融合蛋白
pQE-16载体表达短肽链蛋白，如DHFR融合蛋白
Product Details
此系统含有3个载体（pQE-16、pQE-60和pQE-70），用于表达C端带有6xHis标签的蛋白，推荐用于开放阅读框含有“暂停位点”的蛋白，这可能导致成熟前终止。pQE-60和pQE-70使编码序列的原始起始密码子代替pQE载体的ATG，保护真实的蛋白N端。在构建两个载体时，通过PCR或突变在插入片段的ATG密码子处分别导入NcoI和SphI限制性位点。pQE-16可表达C端带有6xHis标签的DHFR融合蛋白。DHFR（二氢叶酸还原酶）可提高抗原性和稳定性，推荐用于低表达蛋白或易水解的短肽。由于DHFR自身在小鼠和兔中几乎没有免疫原性，DHFR融合蛋白非常适合表位筛选。
Principle
QIAexpress pQE载体含有一个强大的噬菌体T5启动子（被E. coli RNA聚合酶识别），并含有两个lac操纵子遏制模块，用于在E. coli中严谨调控、高水平表达融合蛋白。在高水平lac遏制子存在的情况下，蛋白合成被有效断，细胞毒素载体的稳定性增强。 pQE vectors可在重组蛋白的N端或C端带上6xHis标签。
Procedure
编码目的蛋白的片段被克隆到合适的载体并转化至合适的E. coli表达菌株。加入IPTG诱导表达。Vector pQE-TriSystem载体可转化至E. coli，作为穿梭载体在昆虫细胞中表达重组蛋白，或转染至哺乳动物细胞。
Applications
QIAexpress Expression系统提供高水平蛋白表达，适用于多种应用，包括：
纯化功能、构象有活性的蛋白
变性条件纯化，用于抗体制备
结晶，用于确定三维结构
蛋白间和蛋白与DNA间相互作用分析
400-888-0207
