用于采集并稳定动物血液,纯化RNA或包含miRNA的总RNA
Features
对动物血液进行可靠的基因表达分析
方便采集并保存小体积量血液
快速纯化高品质的总RNA
高效回收miRNA(需单独购买缓冲液)
Product Details
RNeasy Protect Animal Blood System提供完整的方案,用于从动物血液中纯化高品质RNA。可将小鼠、大鼠或其他小动物的血液简单地收集在RNAprotect Animal Blood Tubes中,该收集管中装有的试剂可迅速稳定细胞RNA。然后应用RNeasy Protect Animal Blood Kit纯化总RNA。
Performance
RNAprotect Animal Blood Tubes收集的血液样本可在室温下方便的运输或在冰箱中简单的储存。样本可在15–25°C条件下保存48小时,2–8°C条件下保存两周,或在–20°C条件下保存至少三个月,不会出现明显的RNA降解。动物血液收集在RNAprotect Animal Blood Tubes中可避免转录水平的变化,确保诸如real-time RT-PCR和生物芯片分析等应用中可靠的基因表达分析。使用RNeasy Protect Animal Blood Kit纯化的RNA产量重复性好,只需不到30分钟的操作时间。经验证的RNeasy技术纯化的RNA纯度高,没有基因组DNA污染。
Principle
采集血样的时候,基因表达谱可在几分钟内发生明显的变化。EDTA等抗凝血剂可避免血液凝固,但不能避免mRNA诱导的转录或调控引起的基因表达变化。将动物血液收集在RNAprotect Animal Blood Tubes中可避免转录水平的变化。对稳定的血液进行消化和匀浆后,使用RNeasy硅胶膜技术从样本中纯化RNA。
Procedure
血液样本收集在RNAprotect Animal Blood Tubes中。收集管中的试剂可裂解血液细胞并稳定细胞内的RNA。将RNAprotect Animal Blood Tubes离心使样本沉淀,沉淀水洗后重悬在Buffer RSB中。样本在Buffer RBT中被蛋白酶K消化后,样本离心通过QIAshredder离心柱后实现匀浆。在样本中加入乙醇后,离心通过RNeasy MinElute离心柱。使用DNase消化总DNA,并依次用Buffer RW1和Buffer RPE漂洗。用Buffer REB洗脱获得纯化的RNA。使用RNeasy Protect Animal Blood Kit纯化RNA可在QIAcube全自动核酸纯化仪上实现完全自动化。使用单独的实验方案可纯化包含miRNA的总RNA,并需使用漂洗液Buffer RWT(需单独订购;货号:1067933)。从分开的两部分样本中纯化小RNA(包含miRNA)和大RNA需使用RNeasy MinElute Cleanup Kit。
Applications
运用RNeasy Protect Animal Blood System纯化的总RNA和miRNA适用于多种下游应用,包括:
基因表达分析
RT-PCR
定量real-time RT-PCR
差异显示
cDNA合成