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PCR产物纯化试剂盒
货号:H5060 | 规格:100T | 价格:¥0.00 | 品牌:BMASSAY
本试剂盒回收的DNA可适用于各种常规操作,包括酶切、PCR、测序、文库筛选、连接和转化等实验。

本试剂盒采用离心吸附柱结合独特的缓冲液系统,从酶切、PCR等反应溶液中纯化DNA片段,同时除去蛋白质、无机盐离子及寡核苷酸引物等杂质。使用本试剂盒可回收100bp–10kb的DNA片段,回收率大于80%(<100 bp 和>10kb 的DNA片段回收率为30-50 %)。每个吸附柱每次最多可吸附的DNA量约为10 μg。使用本试剂盒回收的DNA可适用于各种常规操作,包括酶切、测序、文库筛选、连接和转化等实验。


储存条件:在室温(25℃左右)干燥条件下保存


产品特点:

1 结合液PB为亮黄色,便于观察体系的pH是否合适。


2 操作快捷,单个样品操作少于10分钟。


产品组成:

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操作步骤:

1 在PCR反应液中直接加入5倍体积的PB液,颠倒混匀后,全部加入到吸附柱CA2中,10,000g离心30-60秒,到掉收集管中的废液,将吸附柱CA2重新放入收集管中。


注:① 如果PCR反应体系使用了石蜡油,无需去除,但要使用10倍体积的PB液。②如果反应体系小于50μl,用水补至50μl体系,再加入PB液。③如果体系体积大于700μl,请分次上柱,保证全部溶液均加入到吸附柱中。


2 向吸附柱CA2中加入700μl漂洗液PW(使用前请先检查是否已加入无水乙醇),10,000g离心30-60秒,倒掉废液,将吸附柱重新放入收集管中。


3 向吸附柱CA2中加入500μl漂洗液PW,10,000g离心30-60秒,倒掉废液。


4 将离心吸附柱CA2放回收集管中,10,000g离心2分钟,尽量除去漂洗液。


注意:此步必不可少!如果漂洗液有残留,将会影响回收效率和DNA质量,进而影响下游实验;离心后将吸附柱盖子打开,室温放置2分钟,这样将有助于彻底挥发残余乙醇。


5 将吸附柱放到一个干净离心管中,向吸附膜中间位置悬空滴加适量洗脱缓冲液EB,室温放置2分钟。10,000g离心2分钟收集DNA溶液。


注意:① 可将洗脱缓冲液EB预热到60-70℃后再加到吸附膜上,这样可以提高洗脱效率。② CA2柱的洗脱体积不应少于20 μl,体积过小将会降低回收效率。③ 洗脱液的pH值对于洗脱效率有很大影响。若用水做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5范围内,pH值低于7.0会降低洗脱效率


6 DNA产物-20℃保存。


注意事项:在使用本试剂盒前请阅读此注意事项。


1.本试剂盒适用于无选择性地回收溶液中所有 DNA 片段(可去除 50bp 以下的小片段),如需选择性地回收特定片段,同时去除其他不同大小片段,请选择琼脂糖凝胶回收试剂盒。


2. 回收率与初始 DNA 量和洗脱体积有关,初始量越少、洗脱体积越小,回收率越低。


3. 回收小于 100bp 和大于 10kb 的 DNA 片段时,可适当延长吸附和洗脱的时间。


4.如非指明,所有离心步骤均为使用台式离心机在室温下离心。

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