用于立即稳定组织、培养细胞和细菌培养物中的RNA

特征

立即稳定RNA和RNA保护
室温下操作方便安全
易于在可重合的管中收集和储存组织
稳定革兰氏阳性和革兰氏阴性细菌
无需从分选或培养的细胞中取出培养基

产品详情

RNAprotect试剂和管可立即对组织、革兰氏阳性和革兰氏阴性细菌培养物以及分选或培养的细胞中的RNA进行RNase灭活和稳定，以保持基因表达谱，并实现高质量RNA的可重复纯化。在进行RNA分离程序之前，样品在室温下稳定。

性能

RNAprotect组织试剂确保RNase立即失活，并在收获和储存期间稳定和保护样品的RNA表达模式。RNAprotect技术的即时保护确保下游分析真正反映完整组织的表达谱。即使在多次冻融循环后，样品也可以在没有RNA降解风险的情况下存档。

RNAprotect细胞试剂可防止在处理过的细胞中诱导基因表达，并在细胞样品储存期间保留和稳定转录本水平。

RNAprotect细菌试剂适用于多种细菌种类，包括革兰氏阳性（例如，金黄色葡萄球菌和鸟分枝杆菌）和革兰氏阴性（例如，大肠杆菌和鼠伤寒沙门氏菌），并防止RNA变化.在分离RNA之前，细菌可以在最小或复杂的培养基中生长。

基因芯片分析。

从RNA保护稳定样品中纯化的RNA在各种条件下储存，是下游过程的理想选择，如北方印迹和RT-PCR。

原则

一旦生物样品被收获，其RNA就会变得非常不稳定。RNAprotect试剂和管能够立即使RNase失活，稳定RNA并保存RNA表达模式。还可以防止由样品操作触发的基因诱导或下调，从而可以准确分析基因表达。这对于细菌表达谱尤其重要。RNA的酶降解导致许多转录本的减少或丢失，因为细菌mRNA分子的半衰期非常短，只有几分钟。

RNA保护组织试剂可快速渗透组织，从而立即稳定RNA。RNAprotect细胞试剂可立即稳定分选或培养的细胞中的RNA。细胞在室温下稳定，并且可以在RNA纯化之前在环境温度下储存或运输。

程序

为了RNA保护和样品储存，组织样品在收获后立即浸没在适当体积的RNAprotect组织试剂中。RNAprotect组织管在可重合管中提供预先测量的RNAprotect组织试剂体积，便于处理和样品储存。该试剂可在 37°C 下保存 RNA 长达 1 天，在 18–25°C 下保存 7 天，或在 2–8°C 下保存 4 周，从而可以在没有液氮或干冰的情况下处理、运输、储存和运输样品。或者，样品也可以放置在–20°C或–80°C下进行存档存储。
RNAprotect细胞试剂可立即稳定细胞中的基因表达谱。使用其他技术，在添加RNA稳定试剂之前，有必要洗涤或处理细胞（例如胰蛋白酶处理）。通过将RNAprotect细胞试剂直接添加到培养基或缓冲液中的细胞中，可以消除在洗涤或处理步骤中可能发生的表达变化。使用RNAprotect细胞试剂的瞬时RNA稳定也可以扩展到不在培养基或储存溶液中的沉淀细胞。起始材料的数量不得超过1 x 107个细胞。
对于细菌样品，在RNA分离之前，将两体积的RNAprotect细菌试剂直接加入1体积的细菌培养物中，从而立即稳定RNA。稳定化允许使用多种方案进行有效的细菌裂解：酶裂解，机械破碎或两种方法的组合。QIAGEN推荐使用TissueLyser进行有效的机械破碎。

应用

RNA保护试剂和管中稳定的RNA可用于：

总RNA纯化
miRNA纯化