Lysozyme,中文名为溶菌酶,EC Number:3.2.1.17,CAS: 12650-88-3,活性>20KU/mg,纯化自蛋清(egg white),不含DNase、RNase和Protease,可以用于以质粒抽提、蛋白纯化等为目的的细菌裂解。溶菌酶(lysozyme)又称胞壁质酶(muramidase),是一种能水解致病菌中黏多糖的碱性酶,通过破坏细胞壁的N-乙酰胞壁酸和N-乙酰氨基葡糖之间的β-1,4糖苷键,使细胞壁不溶性黏多糖分解成可溶性糖肽,导致细胞壁破裂,内容物逸出而使细菌溶解。
产品组成:溶菌酶(Lysozyme,10mg/ml)由溶菌酶和TRIS等组成,pH值约为8.0,多用于溶解细胞壁以便提取质粒DNA.
储存条件: -20℃
产品特点:
1、抗热性;
2、有机溶剂无法使其完全失活;
3、活力稳定;
4、具有抗菌性,较广的抗菌谱;
5、是有效的防腐剂。
操作步骤(仅供参考):
1.细菌过夜培养菌液10 ml 12,000 rpm离心 5 min 后,弃上清,尽量弃除残余培养基,留取管底部菌体。
2. 加入1 ml细菌裂解液,50μl 10mg/ml 溶菌酶溶液,用吸头吹打至无可见细胞团块,重悬菌体。
注:此步骤可加入蛋白酶抑制剂如PMSF,保护蛋白,抑制降解;如裂解液比较粘稠,可以加入DNaseI溶液,消化基因组DNA。
3. 37℃孵育20 min,期间轻弹离心管数次以加速裂解。
注:溶菌酶的用量和处理时间与处理的细菌种类密切相关,用户可以根据细菌种类进行调节。如革兰氏阳性菌应将处理时间延长到30-60分钟。
4. 裂解完成后 13,000rpm4℃离心5 min,将上清(上清中即为可溶性蛋白)转移至新的离心管中,直接进行下一步纯化或检测实验。
注意事项:
1、该试剂仅用于科研领域,不适用于临床诊断或其他用途。
2、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。